摘要：
目的 制备B族链球菌(GBS)表面免疫原性蛋白(Sip),研究其免疫原性及抗体保护功能,为GBS蛋白疫苗研究奠定基础.方法 采用基因重组技术构建表达载体,并表达GP-Sip融合蛋白.用pET-Sip融合蛋白免疫小鼠,并免疫家兔制备多克隆抗体.Western blot检测GP-Sip蛋白特异性,ELISA检测家兔及小鼠血清中特异性抗体水平,调理吞噬试验检测Sip抗血清的功能.结果 表达载体经酶切和测序证明构建正确,GP-Sip蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达,纯化后纯度可达90%以上.Western blot显示GP-Sip蛋白可与pET-Sip蛋白的免疫血清发生免疫反应.ELISA显示Sip可诱发小鼠产生高水平的IgG抗体.Sip抗血清具有明显地促进吞噬细胞对GBS的吞噬作用.结论 已成功构建GP-Sip表达载体,并高效表达了Sip.该蛋白具有良好的免疫原性,其抗体具有良好保护功能,可作为GBS蛋白疫苗成分或荚膜多糖疫苗载体成分.
