摘要：
诺如病毒是世界急性胃肠炎的重要病原之一.为加强其控制,通过序列比对设计出针对GGⅡ型诺如病毒保守序列的特异性引物与探针,建立了TaqManReal-timeRT-PCR方法.结果显示,此方法对诺如病毒核酸检测高度特异,与轮状病毒、腺病毒、甲型肝炎病毒等无交叉反应,最低检出限可达102拷贝,线性范围为109～102拷贝,标准曲线的相关系数为-1.00.针对标准品质粒检测的批内实验变异系数为0.28%～1.63%(n=6)、批间实验为0.28%～1.05%(n=3),对同一样品分6次进行RNA提取和逆转录,其变异系数为3.88%.对212份临床腹泻标本分别用常规RT-PCR和本文建立的TaqMan Real-time PCR进行检测,发现后者检出率略高于前者.这些结果提示此研究建立的诺如病毒的TaqMan Real-time RT-PCR检测方法可用于临床腹泻粪便标本的检测.
