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神经母细胞瘤细胞分化过程中细胞周期及端粒酶基因的变化

Variation of Cell Cycle and Telomerase Gene Expression in the Differentiation of Neuroblastoma Cells Induced by Retinoids

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收录情况: ◇ 北大核心

机构: [1]首都医科大学附属北京儿童医院外科 [2]首都医科大学细胞生物学教研室
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关键词: 维甲类化合物 端粒酶 神经母细胞瘤 SH-SY-5Y SK-N-SH

摘要:
目的:观察神经母细胞瘤细胞在被维甲类化合物诱导分化过程中细胞形态、细胞周期及端粒酶基因表达方面的变化,探讨其作用机理及临床意义。方法:查耳酮酸(R9158)及丁羟胺酸(R8605)均为新一代合成维甲类化合物,采用工作浓度10-6mol/L,加入两个神经母细胞瘤细胞系SH-SY-5Y和SK-N-SH的培养基,作为观察组;与观察组同浓度的DMSO分别加入两个细胞系的培养基,作为溶剂对照组。分别观察用药前后细胞形态学变化、流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡、原位杂交细胞化学(ISHH)方法检测端粒酶基因(hTR)的表达。结果:1.SH-SY-5Y细胞在药物处理后第5天有明显的神经突起形成,形态类似成熟神经元。SK-N-SH细胞在药物处理后7天内均无明显变化。2.流式细胞分析发现,SH-SY-5Y细胞在药物处理后第5天明显地阻滞于G1期,S期比例显著减少,G2/M期比例基本不变,并有少量细胞凋亡。SK-N-SH细胞在药物处理第3天及第5天均无明显差别,仅第5天有个别细胞凋亡。3.显微镜下观察,SH-SY-5Y细胞于药物作用5天后,hTR阳性细胞显著减少,SK-N-SH细胞则无明显变化。结论:新合成维甲类化合物R9158及R8605诱导维甲酸敏感细胞SH-SY-5Y发生形态学分化,细胞周期阻滞于G1期,端粒酶基因(hTR)表达显著减少,而维甲酸耐受细胞SK-N-SH则无此变化。端粒酶与其他基因相互关联,是维甲类化合物诱导神经母细胞瘤细胞分化过程中重要的调控靶点。

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京儿童医院外科
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