摘要:
目的 探讨经冠状静脉逆行灌注碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌内归巢的影响.方法 杂种犬12只,体重20~25(22.4±1.8)kg,采用开胸结扎法建立急性心肌梗死模型.1周后将存活犬(n=ll)随机分为MSCs组(n=5)和bFGF+MSCs组(n=6).采用密度梯度离心与贴壁培养法在体外分离、培养MSCs,移植前对MSCs进行4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)孵育标记.逆行灌注实验后1周,免疫荧光法比较两组梗死心肌内DAPI阳性细胞数,评价逆行灌注bFGF对MSCs归巢的影响.结果 采用密度梯度离心和贴壁培养法成功分离并富集MSCs,77.19%以上的细胞都处于G0/G1期,强表达CD44,阳性率为95.8%;MSCs体外DAPI标记率高,初始标记率达99.6%.免疫荧光显示,bFGF+MSCs组DAPI阳性细胞数明显高于MSCs组[(325±106)/mm2比(186±67)/mm2,P<0.05],联合组MSCs分布更为均匀;部分MSCs与心肌细胞共定位.结论 经冠状静脉逆行灌注bFGF能更有效地促进MSCs归巢至梗死心肌;同时,MSCs在心肌内的分布也更为均匀.