摘要：
目的:研究晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)和心肌细胞(cardiomyocyte,CM)在非接触条件下共培养对CM细胞增殖、凋亡功能的影响,并分析其相关机制.方法:采用密度梯度法从大鼠骨髓获取单个核细胞,培养28 d,FITC-UEA-I、Dil-acLDL和DAPI三染色鉴定为晚期EPCs.分别吸取晚期EPCs和乳大鼠CM,按0∶1,1∶1,5∶1,10∶1的细胞比率分别植于Transwell小室,下室植入晚期EPCs,上室植入CM.将晚期EPCs与CM非接触共培养12 ～ 48 h,分别采用MTT比色法、Tunel法检测其增殖、凋亡功能.并于晚期EPCs与CM共培养48 h后,应用ELISA试剂盒检测不同比率组(0∶1 ～10∶1)上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度.结果:体外培养7d时,EPCs细胞呈典型长梭形；28 d时,呈铺路石样,并可摄取FITC -UEA-I、Dil-acLDL.晚期EPCs可促进共培养的CM增殖,减少凋亡.随着晚期EPCs与CM细胞比率的增加,不同共培养时间组的CM增殖功能均明显增强(P＜0.05),凋亡功能均明显降低(P＜0.05)；且随共培养时间延长,不同比率组的CM增殖功能亦均明显增强(P＜0.05),凋亡功能均明显降低(P＜0.05)；当晚期EPCs与CM比率为10∶1、共培养48 h时,CM增殖功能最强(P=0.00),凋亡最低(P=0.00).当晚期EPCs与CM共培养48 h后,随晚期EPCs/CM数量比率的增加上清液中VEGF浓度明显增加(P＜0.05).结论:在非接触共培养条件下,随着晚期EPCs与CM比率的增加以及共培养时间的延长,CM增殖明显增强、凋亡明显降低；可能与晚期EPCs通过分泌VEGF从而改善CM增殖、凋亡功能有关.
