摘要：
目的 探讨大鼠心脏微血管内皮细胞的原代培养技术,以获取纯化的大鼠心脏微血管内皮细胞.方法 应用体质量80 g的雄性Wistar大鼠左心室的微血管内皮细胞进行原代培养并传代培养；通过倒置显微镜扫描观察其形态,同时对培养细胞采用免疫组织化学荧光染色法进行内皮表面因子(vWF)鉴定,并用Hoechst染色,于荧光倒置显微镜下观察.结果 体外培养的大鼠微血管内皮细胞呈梭形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列.采用Hoechst染色后,可见90％以上的细胞胞浆和核膜周围被染成红色,细胞核呈蓝色荧光；merge 3染色见细胞胞浆和核膜周围被染成黑色,细胞核呈蓝色；cy-3染色见细胞胞浆和核膜周围被激发出红色光.证明培养细胞为血管内皮细胞.结论 通过改进的微血管内皮细胞分离方法培养获得的细胞,生长状态良好、纯度高,且能够稳定地传代培养.
