摘要：
目的:探讨脂肪因子Omentin-1对泡沫巨噬细胞炎症因子的释放以及凋亡的影响及机制.方法:THP-1细胞系用佛波酯(PMA)诱导为巨噬细胞后,加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)构建泡沫巨噬细胞模型.采用不同浓度Omentin-1孵育泡沫巨噬细胞48 h后,利用Westernblot技术测定细胞中凋亡相关蛋白bcl-2、bax、caspase-3表达情况,并利用Annexin V试剂盒测定细胞凋亡率.在泡沫巨噬细胞中加入Omentin-1以及PI3K/AKT通路阻断剂LY294002,利用RT-qPCR技术及ELISA试剂盒测定细胞内及培养液中炎症因子TNF-α与IL-6的表达与分泌情况.在巨噬细胞中加入Omentin-1,分别于加入后不同时间点提取蛋白,之后采用LY294002抑制磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路,并用Westernblot技术测定细胞中蛋白激酶B以及Ser473位点磷酸化蛋白激酶B的表达量.结果:与对照组相比,加入Omentin-1后泡沫巨噬细胞凋亡率显著下降(P＜0.05),细胞caspase-3、bax蛋白表达显著下降,bcl-2蛋白表达显著上升(P＜0.01),抑制PI3K/AKT通路后,以上效应均显著减弱(P＜0.05).与对照组相比,加入Omentin-1可显著抑制泡沫巨噬细胞炎症因子释放(P＜0.05),抑制PI3K/AKT通路后,此效应显著减弱(P＜0.05).与对照组相比,加入Omentin-1后细胞内Ser473位点磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B比值显著上升(P＜0.01).油红O染色提示Omentin-1可显著减少ox-LDL诱导的泡沫细胞内的脂质含量(P＜0.05),抑制PI3K/AKT通路后此效应未受显著影响(P＞0.05).结论:Omentin-1可能通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B通路调控泡沫巨噬细胞炎症因子释放与凋亡.
