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微RNA-146a反转牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙周膜细胞成骨的抑制作用

microRNA-146a reverses the inhibitory effects of Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide on osteogenesis of human periodontal ligament cells

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资源类型:
Pubmed体系:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]天津医科大学口腔医院口腔颌面外科,300070, [2]天津医科大学口腔医院牙周科,300070 [3]四川大学华西口腔医院口腔颌面外科口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心,成都,610041 [4]首都医科大学宣武医院口腔科,北京,100053 [5]北京大学深圳医院口腔医学中心, 518036
出处:
ISSN:

关键词: 牙周炎 微RNAs 成骨分化 人牙周膜细胞

摘要:
目的 探讨微RNA-146a(microRNA-146a,miR-146a)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)成骨分化的影响及机制,为牙周组织工程学研究提供实验依据.方法 体外培养hPDLC,诱导成骨分化,将细胞分为5组:含5%胎牛血清的α-微量伊格尔培养基培养的hPDLC(非成骨分化培养组);成骨分化液培养的hPDLC(成骨分化培养组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS处理的hPDLC(LPS组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS+miR-146a模拟物处理的hPDLC(LPS+miR-146a模拟物组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS+miR-146a阴性对照处理的hPDLC(LPS+miR-146a阴性对照组),每组设5个复孔.通过实时荧光定量PCR和茜素红染色法分别检测成骨标志物和矿化,同时应用非放射性转录因子检测hPDLC的核提取物中核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65的核活性.结果 与成骨分化培养组相比,LPS组hPDLC中Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,RUNX2)和骨钙蛋白水平显著降低(P<0.05);Pg LPS可以抑制矿化能力,刺激NF-κB p65的核转录活性的表达(成骨分化培养组:1.023±0.217,LPS组:6.252±0.613,P=0.008);与LPS+miR-146a阴性对照组相比,LPS+miR-146a模拟物组第3天检测到hPDLC中除ALP(P=0.167)和RUNX2(P=0.580)外,Ⅰ型胶原(P=0.007)和骨钙蛋白mRNA(P=0.049)的表达均显著增加;第7和14天时Ⅰ型胶原、ALP、RUNX2和骨钙蛋白mRNA水平均显著增加(P<0.05),并可以增强矿化能力,同时miR-146a模拟物可显著降低Pg LPS诱导的hPDLC中NF-κB p65的核转录活性(LPS+miR-146a模拟物组:2.427±0.354;LPS+miR-146a阴性对照组:5.863±0.482,P=0.019).结论miR-146a可以通过促进hPDLC中成骨标志物的表达和抑制炎症通路,逆转Pg LPS对hPDLC成骨分化的抑制作用.

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第一作者:
第一作者机构: [1]天津医科大学口腔医院口腔颌面外科,300070,
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