目的采用大脑中动脉梗死（middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型,研究大鼠脑缺血再灌注后不同时间点脑缺血半暗带区神经生长因子（nerve growth factor,NGF）和脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）表达的变化,以及一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（Nω-nitro-L-argininic methyl ester, L-NAME）对脑缺血大鼠再灌注后NGF和BDNF表达的影响,探讨脑缺血损伤的深层机制。方法将42只健康雄性Sprague-Dawley大鼠采用数字表法随机分为7组:假手术（Sham）组;MCAO再灌注0 h（MCAO 0 h）组;MCAO再灌注6 h（MCAO 6 h）组;MCAO再灌注12 h（MCAO 12 h）组;MCAO再灌注24 h（MCAO 24 h）组;MCAO再灌注72 h（MCAO 72 h）组以及MCAO 24 h+L-NAME组（于MCAO前30 min腹腔注射L-NAME,剂量为1 mg/kg）。每组6只大鼠。采用改良线栓法制备大鼠MCAO再灌注模型,于缺血90 min后拔出线栓进行再灌注。免疫荧光染色法检测再灌注大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF的表达。免疫荧光双标染色法将NO所致的组织损伤标志物3-硝基酪氨酸（3-nitrotyrosine, 3-NT）分别与BDNF和NGF共定位。结果 MCAO组大鼠再灌注后0、6 h,脑缺血半暗带区域几乎未见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注12 h,可见NGF和BDNF阳性细胞。再灌注24 h,半暗带区NGF和BDNF阳性细胞数较再灌注12 h组进一步增多（P(0.05）。至再灌注72 h,半暗带区NGF和BDNF阳性染细胞数较再灌注24 h组减少（P(0.05）。MCAO再灌注24 h组大鼠缺血半暗带区,3-NT分别与NGF和BDNF免疫荧光染色共定位。Sham组大鼠未见3-NT和NGF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和NGF双标阳性细胞。给予L-NAME后,半暗带区3-NT和NGF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少（P(0.05）。Sham组大鼠未见3-NT和BDNF双标阳性细胞,MCAO再灌注24 h组大鼠半暗带区可见大量3-NT和BDNF双标阳性细胞。给予L-NAME后,缺血大鼠半暗带区3-NT和BDNF双标阳性细胞数目比MCAO 24 h组明显减少（P(0.05）。结论脑缺血再灌注可引起大鼠脑组织缺血半暗带区NGF和BDNF表达上调,最初的上调出现在再灌注12 h左右,随再灌注时间延长,NGF和BDNF表达进一步增加,至再灌注24 h达到高峰,随后在再灌注72 h下降。L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO的产生,减少3-NT形成,进而引起NGF和BDNF表达下降,说明脑缺血再灌注过程中,NO促进NGF和BDNF的表达。