摘要:
目的研究远隔缺血预适应(RIPC)血清外泌体对SH-SY5Y细胞基因表达的影响,探讨差异表达基因对神经细胞在糖氧剥夺(OGD)耐受中的作用。方法RIPC前后分离人血清外泌体,取RIPC前外泌体(Hu E-C)和RIPC后外泌体(Hu E-RIPC)。将SH-SY5Y细胞分为空白组(正常培养细胞),对照组(培养液加入Hu E-C)和RIPC组(培养液加入Hu E-RIPC),采用高通量测序各组细胞基因表达并进行生物信息学分析,将3组细胞置于OGD条件下,检测细胞活力,采用实时定量PCR及Westernblot检测与神经低氧/缺血相关的基因表达。结果生物信息学显示,RIPC组热休克蛋白(HSP)基因差异表达增加。MTS检测发现,OGD条件下,RIPC组细胞活力明显高于空白组(0.673±0.056vs0.481±0.027,P(0.01)。实时定量PCR和Westernblot检测显示,OGD条件下,RIPC组HSP70m RNA表达和蛋白表达明显高于空白组和对照组(P(0.05)。结论人RIPC血清外泌体可引起众多基因表达变化,其中HSP70表达增加可能是其低氧耐受增加的一个原因。