目的 分析鞘注甲氨蝶呤（MTX）致脊髓后侧索病变的临床表现、实验室检查、诊断、鉴别诊断及治疗方法。方法 分析2例鞘注MTX致脊髓后索病变的临床资料，并结合文献进行讨论，以供临床医师参考。结果 病例1为亚急性起病，进行性双下肢麻木无力2个月，二便障碍1个月，胸椎核磁示胸髓后索异常信号，亚甲基四氢叶酸还原酶基因为双位点杂合突变型，结合既往左侧乳腺Burkitt淋巴瘤，IV期A，给予10次鞘注MTX，临床上诊断为鞘注MTX致脊髓病变。病例2为原发性中枢神经系统淋巴瘤，给予三联鞘注（阿糖胞苷50 mg+MTX 10 mg+地塞米松5 mg）后，鞘注第6次及第9次后发病，胸椎核磁示胸髓侧后索异常信号，MTHFR（677TT型）纯合子突变。二者经过亚叶酸钙治疗后，症状均明显好转。结论 鞘注MTX的患者应常规MTHFR基因检测，多次鞘注后，患者一旦出现类似亚急性联合变性的脊髓后侧索综合征及马尾神经炎，需考虑鞘注MTX不良反应所致，亚叶酸钙治疗有效。