目的:探讨重组质粒-肝细胞生长因子（pUDK-HGF）基因疗法治疗严重肢体缺血导致静息痛和溃疡的长期疗效和安全性。方法:采用门诊和电话随访的方式对完成pUDK-HGFⅡ期随机双盲安慰剂对照临床试验的患者进行长期随访，观察肿瘤的发生情况，并根据患者意愿进行肿瘤标志物检测、眼底检查、疼痛视觉模拟评分（VAS）和下肢CT血管造影（CTA）等。对观察结果进行描述性统计分析。结果:共53例患者纳入分析，其中15例（28.3%）在Ⅱ期临床试验中为安慰剂组，38例（71.7%）为pUDK-HGF治疗组，中位随访时间为2.8年，范围1.7~3.5年。随访期间，53例患者均未见肿瘤发生。pUDK-HGF治疗组38例患者中18例接受了全面检查和评估，包括肿瘤标志物、眼底和CTA检查，静息痛患者接受了VAS评价。除1例发生一过性癌胚抗原轻度升高外，其他17例患者的肿瘤标志物均正常；18例均未出现增殖性视网膜血管病变。5例静息痛患者Ⅱ期临床试验结束（出组）时3例有效，2例无效；随访结束时CTA评价4例有效，1例无效；VAS评价5例均有效。13例溃疡患者出组时9例有效，4例无效；随访结束时，CTA评价10例有效，3例无效。结论:pUDK-HGF治疗严重肢体缺血导致的静息痛和溃疡比较安全，未发现致癌和导致增殖性视网膜血管病变的风险，长期疗效满意。