摘要:
目的 探讨HMGB2沉默对乳腺癌MDA?MB?231细胞增殖、凋亡及侵袭迁移的影响.方法 采用将靶向HMGB2的寡核苷酸克隆至pLKO.1 puro载体质粒构建靶向沉默HMGB2表达的慢病毒shRNA.将MDA?MB?231细胞分为对照组、空转染组及HMGB2干扰组,其中空转染组及HMGB2干扰组分别转染包含随机序列shRNA和靶向HMGB2 shRNA的病毒液,对照组仅行常规培养而不行任何转染.采用Western blotting检测各组转染48 h后的HMGB2蛋白水平以评价转染效率,采用MTT法计算各组细胞的存活率,流式细胞术检测转染48 h后的细胞凋亡率,Transwell法检测转染48 h后的细胞侵袭和转移水平.结果 HMGB2干扰组的HMGB2蛋白水平低于对照组和空转染组,差异有统计学意义(P<005),提示构建的载体沉默HMGB2的效果显著.与对照组和空转染组比较,HMGB2干扰组的细胞存活率降低,且随着转染时间的延长而呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<005);HMGB2干扰组细胞的早期、晚期及总凋亡率均高于其余两组,且侵袭细胞数目和迁移细胞数目均低于其余两组,以上差异均有统计学意义(P<005).结论 shRNA靶向沉默MDA?MB?231细胞中HMGB2表达效果显著,可抑制细胞增殖及侵袭迁移并诱导细胞凋亡,为乳腺癌靶向治疗提供一定参考.