资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]包头医学院生物医学研究中心
[2]包头医学院基础医学院
[3]包头医学院第二附属医院消化科
[4]泰山医学院附属医院神经内科
泰山医学院
泰山医学院附属医院
[5]丽水学院医学院
丽水学院
[6]首都医科大学宣武医院神经内科首都医科大学宣武医院神经再生教育部重点实验室
神经内科
首都医科大学宣武医院
出处：
ISSN：
关键词：
DNA甲基转移酶3B
293A细胞
细胞增殖
p21
摘要：
目的 构建DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)的一种异构体3B7的真核质粒表达载体,在体外评价其对人胚肾细胞株293A增殖影响.方法 据GenBank中人DNMT3B7 cDNA序列设计并合成特异性引物,以DNMT3B1为模板,利用高保真Taq酶,进行PCR技术扩增DNMT3B7,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中.将携带DNMT3B7基因的质粒pCMV-DNMT3B7及空质粒pCMV-2B转染293A细胞,通过G418筛选出稳定表达的细胞系,MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布.同时检测p21蛋白表达情况.结果 成功构建DNMT3B7的真核表达载体并筛选出稳定表达株,与转染空质粒组相比,稳定过表达DNMT3B7组293A细胞株增殖减慢(P＜ 0.0l);过表达DNMT3B7的293A细胞S期细胞比例显著增多(P＜0.05).p21 mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05).结论 DNMT3B7基因过表达可抑制293A细胞增殖,p21可能参与了这一过程的调节.
基金：
国家自然科学基金资助项目(81060212,81160244,81360316)； 中国博士后基金资助项目(20080430851)； 内蒙古自然科学基金资助项目(2010BS1104)； 内蒙古自治区高等学校科研项目资助课题(NJZY12221,NJZY12225,NJYT-13-A10)；
第一作者：
第一作者机构：
[1]包头医学院生物医学研究中心
[2]包头医学院基础医学院
通讯作者：
通讯机构：
[1]包头医学院生物医学研究中心
[2]包头医学院基础医学院
[3]包头医学院第二附属医院消化科
[6]首都医科大学宣武医院神经内科首都医科大学宣武医院神经再生教育部重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
张姝,张伟,姜树原,等.过表达DNMT3B7质粒载体的构建及对293A细胞增殖的影响[J].肿瘤防治研究.2013,40(12):1128-1133.
