摘要：
目的:研究全长脂联素真核表达质粒对体外培养人类肝星状细胞株(LX-2)细胞,Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,COL-Ⅰ)基因及蛋白的影响,探讨全长脂联素对细胞凋亡的作用及其调节COL-Ⅰ表达的作用机制.方法:实验分为对照组、空质粒组、全长脂联素真核表达质粒组,各组转染48 h后Real-time PCR方法检测COL-Ⅰ mRNA的表达,ELISA法检测ICOL-Ⅰ蛋白水平的表达,MTT检测细胞存活率变化,AnnexinV-FITC检测细胞凋亡率变化,Westernblot检测细胞凋亡蛋白caspase-3的变化.结果:与空质粒组及对照组相比,全长脂联素真核表达质粒组COL-Ⅰ mRNA及蛋白的表达下降(179.00 ng/L±16.83 ng/L vs 532.30 ng/L±27.52 ng/L,570.00 ng/L±16.12 ng/L,均P＜0.01).细胞存活率下降(65.70%±1.56%vs93.15%±1.90%,95.82%±2.52%,均P＜0.01),凋亡率增加(14.70%±2.34%vs 1.60%±0.23%,1.80%±0.15%,均P＜0.01),caspase-3活性蛋白的表达增加(0.62±0.09vs 0.21±0.04.0.22±O.07,均P＜0.01).结论:脂联素可下调LX-2细胞COL-Ⅰ表达而抑制肝纤维化,其机制可能是通过抑制LX-2细胞增殖及增加caspase-3蛋白的途径促进其凋亡.
