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[1]首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室
神经生物学研究室
首都医科大学宣武医院
[2]首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室 北京市100053
神经生物学研究室
首都医科大学宣武医院
出处：
ISSN：
关键词：
神经变性疾病/病因学
蛋白质杂交
质粒
重组
遗传
摘要：
目的:为提供人α-突触核蛋白(α-synuclein)抗原,制备抗体以研究其自身聚集在老年神经变性疾病病理机制中所起作用,重组质粒载体、进行DNA测序,以用于α-突触核蛋白基因在原核细胞中的蛋白表达.方法:将质粒pcDNA3NACP(pcDNA3α-synuclein cDNA)和质粒载体proEXMTHT1分别进行酶切,取α-突触核蛋白cDNA片段,重组于proEXMTHT1质粒载体上;酶切鉴定后测序;再将重组质粒proEXNACP转染进入DH5 α大肠杆菌体内;用IPTG诱导α-突触核蛋白基因产生蛋白;将α突触核蛋白纯化后行Western杂交.结果:质粒proEX MTHT1和pcDNA3NACp经限制性内切酶消化分别得到4750bp和550bpDNA片段.α-突触核蛋白基因在原核细胞中蛋白表达量为10 mg/L.表达蛋白经Westetrn杂交证实为a-突触核蛋白.结论:α-突触核蛋白基因在原核细胞的蛋白表达可作为体内外研究老年神经变性疾病病理机制的基础研究.
基金：
国家科技部973项目资助(G2000057005)~~；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室
[2]首都医科大学宣武医院北京老年病研究所神经生物学研究室 北京市100053
推荐引用方式(GB/T 7714)：
李淑婷,陈彪.老年神经变性疾病机制研究的基础:人α-突触核蛋白基因在原核细胞中的蛋白表达[J].中国临床康复.2004,8(10):1866-1867.
