摘要：
目的 确认肿瘤干细胞(CSC)发生β-连环素(β-catenin)核易位能否分化出钠碘转运体(NIS)膜表达缺失、对131I治疗抵抗的甲状腺癌细胞.方法 从人甲状腺滤泡癌细胞FTC133中分选侧群干细胞(SP),并进行细胞“干性”鉴定;对FTC133来源的SP细胞进行β-catenin转染,再将其促分化培养,并收集分化细胞.应用Western印迹、Transwell、MTT方法,验证分化细胞的上皮细胞间质转化(EMT)属性及体外增殖侵袭能力的变化;应用免疫荧光染色和细胞摄碘试验,观察分化细胞的NIS功能性表达及摄碘能力的变化;应用分化细胞建立严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠皮下瘤模型,观察瘤体对131I体内治疗的反应,并应用免疫组化技术初步检测131I治疗相关功能蛋白的表达变化.结果 FTC133中侧群干细胞约0.03％.应用β-catenin转染FTC133源SP细胞后,其分化细胞中出现了典型EMT转化,其中上皮属性蛋白(E钙黏素和细胞角蛋白18)表达缺失,间质属性蛋白(波形蛋白、纤连蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活因子)反常表达;与未转染组和空质粒转染组相比,转染组SP细胞分化细胞体外增殖能力分别增强了约85.4％和81.0％(均P＜0.01),侵袭能力则上升了78.8％和84.4％(均P＜0.01).免疫荧光染色显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞出现明显的β-catenin核易位,同时伴随NIS蛋白由膜表达向浆表达的显著转变;体外摄碘率则分别下降约52.8％和45.2％(均P＜0.01).动物实验进一步显示,β-catenin转染SP细胞后,其分化细胞体现了很强的肿瘤生长促进能力和对抗131I治疗的能力(均P＜0.05).结论 干细胞发生β-catenin核易位可能分化为对131I治疗抵抗的甲状腺癌细胞.
