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荧光定量PCR检测卡他莫拉杆菌感染的实验室诊断方法学建立及应用

Development of real-time fluorescence quantitative PCR for the detection of Moraxella catarrhalis

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京友谊医院儿科北京100050 [2]首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所热带病防治研究北京市重点实验室 [3]首都医科大学附属北京儿童医院
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关键词: 卡他莫拉杆菌 儿童呼吸道感染 荧光定量PCR

摘要:
目的 建立荧光定量PCR检验卡他莫拉杆菌的实验室诊断方法并检验临床样本.方法 针对卡他莫拉杆菌外膜蛋白COPB设计引物及探针;构建含卡他莫拉杆菌目的基因片段的质粒,梯度稀释后作为标准品,绘制标准曲线;验证实验方法的敏感性;通过检测7种病原体标准株验证该方法的特异性.用新建荧光定量PCR检测321例诊断为哮喘的儿童患者咽拭子标本.结果 绘制新建荧光定量PCRTaqman探针法检测质粒标准品的标准曲线,新建实验室诊断方法的敏感性可达10拷贝/反应,研究方法可成功区分卡他莫拉杆菌与其他6种病原体DNA.检测321例临床咽拭子样本,卡他莫拉杆菌阳性25例,阳性检出率为7.79%.结论 新建荧光定量PCR法具有较高的灵敏度、特异性,能简单、快速、准确、灵敏地检测卡他莫拉杆菌,可以应用于临床样本的检测.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京友谊医院儿科北京100050 [2]首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所热带病防治研究北京市重点实验室
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