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◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069
首都医科大学
[2]首都医科大学附属北京天坛医院北京100050
首都医科大学
首都医科大学附属北京天坛医院
首都医科大学附属天坛医院
出处：
ISSN：
关键词：
PINK1
α-synuclein
蛋白质相互作用
共定位
摘要：
目的:利用蛋白质组学方法和激光扫描共聚焦显微镜来鉴定帕金森病相关蛋白PINK1和α-突触核蛋白(α-synuclein)之间的相互作用关系及两种蛋白在MN9D细胞中的分布.方法:将α-synuclein基因插入pGEX-4T-1载体,经DNA测序证明形成GST融合蛋白,经大肠杆菌BL-21表达纯化后,与MN9D细胞裂解液共孵育,检测PINK1与α-synuclein蛋白间的相互作用.并应用MN9D细胞的内源性PINK1与α-synuclein进行免疫共沉淀实验,进一步验证两蛋白之间的相互作用.MN9D细胞经免疫细胞化学染色,利用激光扫描共聚焦显微镜观察两种蛋白的细胞内分布及共定位状态.结果:利用GST-α-synuclein融合蛋白捕获及免疫共沉淀技术,检测到特异的PINK1条带.激光扫描共聚焦显微镜检测到两者存在部分共定位.结论PINK1和α-synuclein在体外和细胞内均可发生相互作用并在MN9D细胞中存在共定位关系.
基金：
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2006CB500706)%国家高技术研究发展计划(863计划)(2006AA02A408)%国家自然科学基金(30670655%7042008)%北京市自然科学基金及市教育委科技发展规划项目(7082011%KM200610025002)%高等学校博士学科点专项科研项目(20060025004)%北京市属市管高校人才强教计划项目(IHLB)
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室神经变性病教育部重点实验室北京100069
[2]首都医科大学附属北京天坛医院北京100050
推荐引用方式(GB/T 7714)：
范春香,崔韬,谷利,等.帕金森病相关蛋白PINK1和α-突触核蛋白相互作用研究[J].中国生物工程杂志.2008,28(12):7-11.
