摘要：
目的:研究分离肺炎链球菌苯唑西林(OX)纸片清晰抑菌环内散在克隆与产生清晰抑菌环的主要克隆的简易方法.方法:以OX纸片清晰抑菌环内存在散在克隆的4株临床分离株R0137、S1039、R1284和R2034为研究对象,用常备的药敏培养基和OX纸片尝试分离散在克隆和主要克隆,并以青霉素结合蛋白基因(pbp)pbp1a、pbp2b和pbp2x限制性片段长度多态性(RFLP)分析和盒式-聚合酶链反应(BOX-PCR)菌株亲缘关系鉴定研究所分离菌株间的关系.结果:于同一菌株分离出的克隆OX纸片药敏检测结果均不一致;除S1039外,青霉素E test检测结果也不一致.从R0317、S1039各分离出2株,2株间pbp酶切图谱相同,BOX-PCR属于同一型;而从R2034分离出的2株,pbp酶切图谱与BOX-PCR均不相同;从R1284分离出3个具有不同药敏表型的克隆,其中2株pbp1a和pbp2b酶切图谱相同,BOX-PCR属于同一型;另外1株pbp2b酶切图谱与前2株相同,而pbp1a和pbp2x不同,BOX-PCR属于不同型.结论:用药敏培养基和药敏纸片可成功分离不同耐药水平的混合菌株,方法简单易行.对所分离的菌株的分子生物学研究可能揭示自然过程中耐药基因逐步变异的特征.
