摘要:
目的:血管平均滑肌细胞的凋亡在球囊损伤后30分钟内即已经开始,用基因转移的方法加速这一过程是控制再狭窄的途径之一.选择野生型p53作为目的基因,观察其对血管平滑肌细胞生长及凋亡的影响.方法:构建了野生型p53基因重组反转录病毒载体pLXSN-p53.重组载体转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,测定转染效率和p53基因的表达,用细胞存活曲线、流式细胞仪和DNA"ladder"法检测了细胞生长和凋亡状况.结果:采用pLXSN-p53转染培养的大鼠血管平滑肌,转染效率接近100%,转染后的宿主细胞内可检测到外源性p53mRNA和外源性p53蛋白,表明基因在平滑肌细胞内获得了良好的表达.用流式细胞仪检测发现在转染后24小时,宿主细胞G1期数量明显增多,S期细胞数量减少,而且有大量的亚二倍体细胞,表现为G1期抑制和细胞凋亡.采用经典的DNA"ladder"法检测发现,宿主细胞大量凋亡.结论:以上结果说明外源性p53蛋白的表达可明显促进平滑肌细胞的凋亡.