摘要：
目的 通过体外损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)构建冠状动脉痉挛微环境,为冠状动脉痉挛在内皮细胞水平的研究提供新方法.方法 培养HUVECs,采用分别用不同浓度(0、25、50、75、l00μg/mL)脂多糖(LPS)体外诱导HUVECs损伤,建立细胞损伤模型,Cellcounting kit-8(CCK8)法检测细胞活力,超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒检测超氧化物歧化酶抑制率.采用乙酰胆碱(Ach)刺激细胞构建冠脉痉挛微环境模型,倒置荧光显微镜检测细胞内钙离子水平([Ca2]i)的变化评价模型的模拟.结果 LPS作用24小时诱导内皮损伤呈剂量依赖性,LPS浓度在75μg/mL时HUVECs与其他浓度相比细胞存活率明显降低(P＜0.05),并且SOD抑制率下降,间接反映内皮细胞损伤模型构建成功.Ach刺激未受损伤的HUVECs,[Ca2+]i明显增加,而Ach刺激LPS损伤的HUVECs,[Ca2+]i水平变化不显著,说明冠脉痉挛微环境模拟成功.结论 Ach刺激未受损伤细胞时,细胞内钙离子明显增加,而Ach刺激受损伤的细胞时,细胞内钙离子变化不明显.本模型为冠脉痉挛在内皮细胞水平的研究提供了新思路.
