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氯化镁对样本保存液相关性能的影响

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]赤峰市医院 / 首都医科大学宣武医院内蒙古医院 / 内蒙古医科大学赤峰临床学院医学检验中心,内蒙古赤峰 024000 [2]湖北时珍实验室 / 湖北中医药大学,湖北武汉 430065
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关键词: 氯化镁 样本保存液 防冻 抑菌 核酸提取

摘要:
目的 探讨氯化镁对样本保存液防冻、抑菌、核酸提取效果及临床病原微生物核酸扩增结果判读的影响。方法 制备含不同浓度(0、0.1、0.5、1.0 mol/L)氯化镁样本保存液并据此进行分组,使用生理盐水稀释菌液作为阳性对照组。在不同温度(4℃、-20℃、-40℃)下观察不同浓度组氯化镁样本保存液的冻结情况。使用细菌培养方法观察不同浓度组氯化镁样本保存液中的细菌在不同温度下于培养基上生长的情况。将神经瘤母细胞N2A置于不同浓度氯化镁样本保存液,室温放置0.5 h后提取核酸并进行琼脂糖凝胶电泳,随后将获得的核酸进行逆转录并扩增β-actin内参基因。使用严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)质控品模拟临床病原样本并对其进行核酸提取和扩增。结果 与0 mol/L浓度组的氯化镁样本保存液比较,1.0 mol/L浓度组的氯化镁样本保存液在-20℃中存放4 h依旧呈液体状态,防冻效果最佳。0.1、0.5、1.0 mol/L三个浓度组的氯化镁样本保存液的抑菌效果较佳,在培养皿上未观察到大量细菌生长。0.1、0.5、1.0 mol/L三个浓度组的氯化镁样本保存液中的神经瘤母细胞N2A的DNA提取不受影响,1.0 mol/L浓度组的β-actin扩增Ct值与0 mol/L浓度组接近(P)0.05)。不同浓度组的氯化镁均不干扰SARS-CoV-2质控品的核酸提取和扩增(P)0.05),对其结果的判读无影响。结论 1.0 mol/L氯化镁可延缓样本保存液的冻结。0.1、0.5、1.0 mol/L三个浓度的氯化镁对样本保存液的抑菌、核酸提取及临床病原微生物核酸扩增结果判读均无影响。

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第一作者机构: [1]赤峰市医院 / 首都医科大学宣武医院内蒙古医院 / 内蒙古医科大学赤峰临床学院医学检验中心,内蒙古赤峰 024000
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