资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
◇ 中华系列
文章类型:
机构:
[1]首都医科大学宣武医院神经内科,100053
神经内科
首都医科大学宣武医院
[2]首都医科大学宣武医院细胞治疗中心, 100053
首都医科大学宣武医院
出处:
ISSN:
关键词:
视神经脊髓炎
慢病毒属
水通道蛋白4
免疫荧光技术
摘要:
目的 构建水通道蛋白4(AQP4)慢病毒表达载体,并检测视神经脊髓炎(NMO)患者血清中的抗AQP4抗体.方法 从人胶质母细胞瘤中提取RNA,通过RT-PCR获得人AQP4目的片段,将目的片段克隆到慢病毒表达载体中,转染HEK-293T细胞,通过RT-PCR、Western印迹及细胞免疫荧光检测鉴定AQP4表达,并对人血清中抗AQP4抗体初步检测.结果 质粒测序结果与Genbank中人AQP4编码片段完全相符,转染人AQP4的HEK-293T细胞能稳定表达AQP4.细胞免疫荧光法检测12例NMO患者血清,11例阳性(91.7%);34例多发性硬化阳性4例(11.8%);50名健康人群血清均为阴性.结论 HEK-293T细胞经水通道蛋白4慢病毒表达载体转染后能够稳定表达AQP4,可用于临床NMO患者抗AQP4-抗体的检测.
基金:
首都医科大学基础临床联合攻关项目 (JL2007-10)
第一作者:
第一作者机构:
[1]首都医科大学宣武医院神经内科,100053
通讯作者:
通讯机构:
[1]首都医科大学宣武医院神经内科,100053
推荐引用方式(GB/T 7714):
廖张元,叶静,关云谦,等.水通道蛋白4慢病毒表达载体的构建与临床应用[J].中华医学杂志.2010,90(3):208-212.