摘要：
目的 探讨腺病毒载体转染单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSVtk)基因对移植静脉内膜增生的作用.方法 用Wistar大鼠建立自体静脉移植模型.以载有HSVtk(4×109 plaque forming units)基因的腺病毒孵育颈静脉,将静脉倒置移植于肾下腹主动脉.从移植术后第3 d开始腹腔注射丙氧鸟苷[ganciclovir,GCV,60 mg/(kg · d),2次/d]共21 d,取出移植静脉标本后用PCR法检测HSVtk基因的表达,用原位杂交法检测基因的转录; 进行弹力纤维染色及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色,观察内膜增生及平滑肌细胞增殖; 用TUNEL法观察移植静脉平滑肌细胞凋亡情况.结果 移植静脉内膜进行性增厚,新生内膜中有大量增殖状态的平滑肌细胞.移植后第3 d,转染HSVtk基因的静脉经PCR扩增出590 bp阳性条带,HSVtk基因开始表达mRNA.HSVtk/GCV对静脉内膜增生有明显抑制作用,而单独予以HSVtk对内膜增生无影响[(17.2±3.2) μm vs (31.1±2.5) μm, P＜0.05].HSVtk/GCV使静脉中平滑肌细胞增殖指数下降为(9.1±2.3)%,凋亡细胞指数升高到(28.7±3.6)%,分别于空白对照组[(38.7±5.6)%,(18.5±2.6)%]相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HSVtk/GCV系统通过抑制平滑肌细胞增殖及促进细胞凋亡抑制移植静脉内膜增生.
