目的探讨以腺病毒为载体介导胸苷激酶(tk)基因对静脉平滑肌细胞增殖及内膜增生的抑制作用.方法腺病毒载体携tk及β-半乳糖苷酶(lacZ)基因转染人的大隐静脉平滑肌细胞及大隐静脉片,以不同浓度的更昔洛韦(GCV)培养.通过X-gal染色观察标记基因lacZ的表达效率.将转染tk基因阳性与tk基因阴性的平滑肌细胞以不同的比例混合培养观察旁观者效应.将转染tk基因的静脉片在含有GCV的培养液中培养14 d,取标本进行HE、VG染色,辅以计算机图像分析,观察内膜增生情况.结果腺病毒载体能有效地转染培养的平滑肌细胞和静脉片中的平滑肌细胞,外源基因表达持续14 d.平滑肌细胞增殖受抑制程度与GCV的浓度和tk表达的水平呈正相关.转染lacZ的平滑肌细胞则不被GCV抑制.混合细胞培养(tk阳性及tk阴性细胞混合),当10%的细胞表达tk基因时,细胞生存率下降了55%.在静脉片培养实验中,tk/GCV组与对照组(lacZ/GCV和tk/GCV-)比较,前者内膜增生60%受到抑制. 结论 tk基因合并GCV治疗具有抑制平滑肌细胞增殖和移植静脉内膜增生的作用, tk基因治疗具有旁观者效应.