目的 了解14型肺炎链球菌的抗生素敏感性及分子流行病学特征.方法 以北京儿童医院1997-2010年分离自儿童鼻咽拭子的14型肺炎链球菌分离株为研究对象,采用E-test法和纸片扩散法检测菌株对11种抗生素的敏感性,采用多位点序列分型(MLST)确定菌株序列型(ST),eBURST软件分析确定克隆群(CC).聚合酶链式反应(PCR)检测红霉素耐药基因ermB和mefA,扩增并测序二氢叶酸还原酶基因dhfr.结果 肺炎链球菌分离株中14型所占比例在监测期间升高,从1997-1999年的3.9％升高至2010年的9.3％.61株14型肺炎链球菌均对青霉素、阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松敏感,但MIC50、MIC90和最大MIC值在监测期间升高.头孢呋辛不敏感率从1997-1999年的0上升至2010年的84.6％.61株均对红霉素耐药,携带ermB基因,4株(6.6％)同时携带mefA基因.36株磺胺耐药菌株均携带Ilel00-Leu变异.MLST共分出11种STs,ST875最常见(32株,占52.5％),其次是ST876(13株,占21.3％).从1997到2010年,CC875的构成比下降(从1997-1999年的100％降为2010年的0),CC876的构成比升高(从1997-1999年的0升至2010年的92.3％).CC876对β-内酰胺类抗生素耐药性明显高于CC875.结论 1997年到2010年肺炎链球菌中14型的构成比升高,14型菌株对β-内酰胺类抗生素耐药性增强,与具有高β-内酰胺类抗生素耐药性的克隆群CC876的播散有关.