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◇ 北大核心
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学宣武医院
首都医科大学宣武医院
[2]首都医科大学细胞生物学系
首都医科大学
[3]首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室
首都医科大学
出处：
ISSN：
关键词：
Nurr1
SK-N-SH细胞
基因转染
TH
分化
摘要：
为研究外源性Nurr1基因过表达对转染细胞的作用,探讨Nurr1基因调控多巴胺能神经元分化的机制.本研究应用:(1)pBK-RSV-Nurr1质粒经脂质体法转染SK-N-SH细胞,G418筛选;用RT-PCR和免疫细胞化学方法检测基因转染细胞Nurr1mRNA及Nurr1蛋白的表达;(2)all-trans-RA、9-cis-RA、forskolin诱导基因转染细胞,RT-PCR及免疫荧光细胞化学方法检测基因转染细胞MAP2和TH的表达.结果显示:(1)经RT-PCR检测,基因转染细胞表达Nurr1 mRNA;免疫细胞化学染色结果显示基因转染细胞表达Nurr1蛋白,说明外源性Nurr1基因在转染细胞内过表达;基因转染细胞形态与正常细胞相比没有明显变化,生长速度略有降低并表达成熟神经元的特异性标识物MAP2,但不表达多巴胺能神经元的特异性标识物TH.(2)尽管RA、forskolin诱导可促进Nurr1基因转染的SK-N-SH细胞进一步向成熟神经元分化,但不能诱导基因转染细胞表达TH.结论:单纯的Nurr1过表达可以促进SK-N-SH细胞向成熟神经元方向分化,但不足以激活TH基因转录.TH基因的转录激活还需要除Nurr1以外的其它细胞(或神经元)的环境或因子的共同作用.
基金：
国家重点基础研究计划(G1999054008)； 国家自然科学基金(No. 30270433)； 首都医学发展科研基金； 首都医科大学基础与临床合作研究基金； 北京市优秀人才培养专项经费资助项目；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院
通讯作者：
通讯机构：
[3]首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
赵咏梅,张海燕,刘扬,等.外源性Nurr1基因过表达对SK-N-SH细胞分化作用的研究[J].神经解剖学杂志.2005,21(1):23-28.
