摘要：
目的 探讨RNA干扰中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)基因的表达对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制.方法 提取人脑胶质瘤组织及人脑胶质瘤SHG-44、U87、U251细胞中的蛋白,Western blot检测NGAL的表达;将siRNA-NC、NGAL-siRNA1、NGAL-siRNA2、NGAL-siRNA3转染U251细胞,未转染任何siRNA的作为对照组,各组细胞转染48h后,Western blot检测NGAL的蛋白表达;流式细胞仪检测细胞转染48h的细胞凋亡,Western blot检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达.结果 脑胶质瘤组织中NGAL的mRNA和蛋白表达(0.458±0.042)显著高于瘤旁组织(0.098±0.015)(tmRNA=7.113,PmRNA=0.003;t蛋白表达=8.532,P蛋白表达=0.002),U251细胞中NGAL的蛋白表达最高,选择作为后续研究;NGAL-siRNA组细胞凋亡率[(15.62±1.94)%]及leaved Caspase-3(0.094±0.021)蛋白表达显著高于对照组[(2.18±0.67)%,0.032±0.015],Notch1(0.204±0.028)、Hes1(0.103±0.019)蛋白表达显著低于对照组(0.453±0.041、0.215±0.029)(t凋亡率=9.995,P凋亡率=0.001;tCleaved Caspase-3=5.898,PCleaved Caspase-3=0.006;tNotch1=8.112,PNotch1=0.003;tHes1=8.824,PHes1=0.003).结论 NGAL基因在人脑胶质瘤组织及细胞中高表达,通过RNA干扰沉默NGAL表达可抑制人脑胶质瘤细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与Notch信号通路有关.
