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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]100029首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室
临床科室
动脉硬化门诊
首都医科大学
首都医科大学附属安贞医院
首都医科大学附属北京安贞医院
出处：
ISSN：
关键词：
家族性高胆固醇血症
LDLR基因
热点突变
Taqman探针
摘要：
目的:建立Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测家族性高胆固醇血症(FH)患者低密度脂蛋白受体(LDLR)基因热点突变的简便方法.方法:①入选94例临床确诊FH患者为研究对象,30例健康人作为阴性对照及明确存在LDLR基因热点突变W462X、A606T和D601Y的FH患者各1例作为阳性对照,分别提取外周血DNA;②应用Primer Premier v3.0软件设计3个热点突变的特异性引物和Taqman MGB探针;③运用Taqman探针实时荧光定量PCR方法,对3例阳性对照及30例健康对照进行检测,检验方法的准确性;④同法检测94例确诊FH患者的基因组DNA;⑤运用Touch-down PCR方法对发现突变患者进行一代测序验证.结果:①3例阳性对照均检测到相应突变,30例健康对照均未检测到突变,证实此方法能够准确检测到基因突变位点;②94例确诊FH患者中发现13例W462X、3例A606T、1例D601Y,初步计算3个热点突变约占全部FH患者的18.1％;③对发现突变的17例患者进行一代测序验证,结果完全一致.结论:成功建立Taqman MGB探针实时荧光定量PCR方法,为FH患者LDLR基因热点突变的检测提供了快速可靠的技术手段.
基金：
国家自然科学基金资助项目(81471098,81670811)
中文影响因子：
第一作者：
第一作者机构：
[1]100029首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
王伟,吴月,江龙,等.家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因热点突变Taqman MGB探针检测方法的建立及应用[J].心肺血管病杂志.2017,36(2):130-133.
